制备液相知多少
色谱分析的目的
分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量;制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。
为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。
然而,当色谱柱上样品负载加大的时候,往往导致柱效急剧下降而得不到纯的产品。
制备色谱,要解决容量与柱子效果之间的矛盾,对重现性也要考虑。
从经济上来说。
制备色谱要争取少用填料,少用溶剂,要尽可能多的得到产品。
液相色谱操作要求
1、液相开机前先检查洗针液、柱塞清洗液是否足够; 2、液相开机后,首先确保柱塞清洗运行,中试放大制备系统报价,再执行其它操作。
3、开机排气时,有“purge”阀的仪器应先打开“purge”阀再开泵以5ml/min的流速排气,关“purge”阀的时候先把流速降到 1ml/min再关,切不可吧顺序弄反,否则系统压力会瞬间变高。
4、使用自动进样器时,广州中试放大制备系统,建议启用“洗针进样”方式,以降低样品残留,中试放大制备系统费用,对于有些强残留的物质可以选择降低浓度或减小进样量。
5、液相色谱系统压力高时考虑色谱柱堵了,如果将液相色谱换成两通压力依旧高,中试放大制备系统多少钱,应该考虑系统管路某部分堵了。
管路堵的情况下可以使用热水清洗。
对堵塞的通道可以用热水清洗。
制备液相色谱特点和优点
高压—压力可达150~300Kg/cm2。
色谱柱每米降的压为75 Kg/cm2以上。
高速—流速为0.1~10.0 ml/min。
高效—可达5000塔板每米。
在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。
同时消耗样品少。
HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:
速度快—通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。
分辨率高—可选择固定相和流动相以达到较好分离效果。
灵敏度高—紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。
柱子可反复使用—用一根色谱柱可分离不同的化合物。
样品量少,容易回收—样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
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