HPLC分析流程图

现代HPLC一般都做成一个个单元组件，然后根据分析要求将各所需单元组件组合起来。

基本的组件是高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据系统(目前基本上为色谱工作站，记录仪和积分仪已很少见)。

此外，还可根据需要配置流动相在线脱气装置、梯度洗脱装置、自动进样系统、柱后衍生系统、样品收集系统和全自动控制系统等。

HPLC的工作过程：输液泵将流动相以稳定的流速(或压力)输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将样品导入，流动相将样品带入色谱柱，在色谱柱中各组分因在固定相中的分配系数或吸附力大小的不同而被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至数据系统记录、处理以及保存。

HPLC概述

高效液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项高效、快速的分析分离技术，是现代分离测试的重要手段。

色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。
又称为色层法、层析法。

HPLC是在经典的液相色谱法基础上发展起来的，其以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。
其分离机制与常规柱色谱相同，但填料更加精细，需高压泵推动，柱效高，分析速度快。

与气相色谱不同的是液相色谱中流动相亦参与组分的分离过程，其组成、比例和pH值可灵活调节，分离模式多样。
在实际操作中主要通过改变流动相的组成来调节样品在色谱柱的保留值和选择性，高效液相色谱多少钱，从而使不同样品得到分离。

高效液相色谱法的应用范围十分广泛，对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，几乎所有的化合物包括高沸点、极性、离子型化合物和大分子物质均可用高效液相色谱法分析测定，因而弥补了气相色谱法的不足。
在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20% ，而80% 则需用高效液相色谱来分析。

液相色谱柱的再生

因为，色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，高效液相色谱，一般来说是柱效的下降。

1.反向柱的再生：

2.正相柱的再生：

3.离子交换柱的再生：

长时间在缓冲溶液中使用和进样，高效液相色谱费用，将导致色谱柱离子交换能力下降。
用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，高效液相色谱哪个生产厂家好，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

特别说明：

再生过程必须随时关注柱压变化，柱压过高易导致硅胶变形与开裂及键合相极性端连接顺序紊乱，同时要保证再生时间足够。
再生时尽量选择不具备在线脱气的独立泵送系统色谱仪器进行

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