液相色谱理论发展简况

色谱法的分离原理是:溶于流动相 (mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase) 发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，高效液相色谱费用，从而先后从固定相中流出。
又称为色层法、层析法。
   色谱法很早是由植物学家茨维特(Tswett)在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描述他的实验，色谱法(Chromatography)因之得名。
后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。

高效液相色谱仪流动相(MOBLLE PHASE)的问题

1、流动相的过滤。

配制好的流动相在使用前一定要先用0.5um孔径的微孔滤膜来过滤。
这是因为溶液中含有很多肉眼难以发现的微小颗粒，如果不把它们滤除掉，就会堵塞泵口、柱头上的过滤器，这样就堵塞了流动相的正常通道，使色谱柱的阻力增加，柱压升高，柱效下降。
碰到这种情况时，要换用经过滤的流动相，高效液相色谱哪个稳定性好，并将堵塞的滤器拆下来浸泡在20%的硝酸水溶液中以超声波清洗机清洗20分钟，以除去滤片上的堵塞物。

2、流动相的脱气。

流动相在使用前必须脱气，以尽可能的除去溶解在流动相中的气体，否则，这些气体会使柱填料的性能降低，还能够对检测器的信号产生很大的干扰。
脱气有多种方法，如超声脱气、真空脱气、氮气脱气等。
真空脱气法和氮气流脱气法是目前常用的脱气法。
水和甲醇混合后会产生大量的气泡，高效液相色谱哪个生产厂家好，如果不脱气就使用，气泡就会进入色谱柱和检测器，并将影响分析工作的正常进行。

高效液相色谱仪的使用保养以及故障处理--使用试管的问题

1、试管的洁净问题。

高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方法，如果因使用不洁净的试管，便会影响试验结果的准确性。
例如，在用甲醇作溶剂来溶解样品时，所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的，因此，在每次进样时，都有一个保留时间固定的干扰峰存在，后经证实，此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所产生，换用玻璃试管后，干扰峰消除。

2、塑料试管的溶解问题。

近年来，一次性塑料试管给试验人员带来了极大的方便，高效液相色谱，但是，在使用过程中一定要注意有机的溶剂对试管的溶解现象，在利用此种试管提取样品时，有些有的溶剂对管壁有溶解现象，这些被溶解下来的物质有时也能在检测器上产生信号，从而干扰样品的测定。
这时，可用相同的实验条件先试验一下，看看不含被抽提物时，提取液在检测器上能否产生干扰信号，如确有干扰信号存在，就只能换用耐有机的溶剂的玻璃试管了。

3、被测样品在试管壁上的吸附问题。

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