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HPLC的各系统
概括HPLC是有五大系统构成:动力系统,进样系统,分离系统,高效液相色谱,检测系统,数据分析和记录系统构成。
其中:
动力系统:泵
进样系统:六通阀和进样针,或者自动进样器
分离系统:色谱柱
检测系统:检测器,一般有紫外检测器,荧光检测器,示差折光检测器,MS检测器等等。
记录系统:电脑工作站等
连接这些设备的都是由一根根不锈钢管或者PEEK管构成。
液相色谱柱的再生
因为,色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,高效液相色谱价格,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说是柱效的下降。
1.反向柱的再生:
2.正相柱的再生:
3.离子交换柱的再生:
长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降。
用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。
特别说明:
再生过程必须随时关注柱压变化,高效液相色谱费用,柱压过高易导致硅胶变形与开裂及键合相极性端连接顺序紊乱,同时要保证再生时间足够。
再生时尽量选择不具备在线脱气的独立泵送系统色谱仪器进行
高效液相色谱仪操作进样阀的问题
1、进样量的控制。
用进样阀来进样时,阀内的样品环是定量的,(一般分析型进样阀的样品环体积为20ul),由于进样时,注射到进样阀内的样品溶液在样品环的管路中有径向的速度梯度(即管轴处比管壁处的液流速度快)。
因此,要想使样品环中充满样品溶液,从而使用进样阀来准确地定量,则必须使进样量大于样品环体积的2倍。
2、进样阀的清洁问题。
如果样品环中有上次进样时样品的残留,高效液相色谱多少钱,必然会污染下次注射进的样品,为防止这种现象的发生,应按步骤操作。
3、进样阀溢流管的堵塞。
有时,进样阀的溢流管会发生堵塞现象,向进样阀内注射样品时,注射针推不动。
此故障是由于溢流管的堵塞所致。
堵塞的原因多半是由于溶解样品的流动相用的是盐溶液,而其中的盐在溢流管的排空端口处结晶所致。
此时,可用小烧杯盛少量蒸馏水对溢流管口稍加浸泡,端口处盐的结晶就能被溶解掉,故障排除。
如能在每次进样完成之后,用蒸馏水反复冲洗至溢流管中的盐分全部冲出,则可避免此故障的发生。
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